Εξάρτηση δοκιμής AEA Elisa Anandamide 0.022ng/μιλ. με την ισχυρές ιδιομορφία/την ευαισθησία

Ανθρώπινη υψηλή εξάρτηση 96 AEA ELISA Anandamide ιδιομορφίας και ευαισθησίας φρεάτια

Cat.No Ε3875HU

Τυποποιημένη σειρά καμπυλών: 0.05ng/ml - 20ng/ml

Ευαισθησία: 0.022ng/ml

Μέγεθος: 96 φρεάτια

Αποθήκευση: Αποθηκεύστε τα αντιδραστήρια σε 2-8°C. Για την έξι μηνών αποθήκευση αναφερθείτε στην ημερομηνία λήξης το κρατά σε -20°C. αποφεύγει τους επαναλαμβανόμενους thaw κύκλους. Εάν τα μεμονωμένα αντιδραστήρια ανοίγουν συνιστάται η εξάρτηση να χρησιμοποιείται μέσα σε 1 μήνα.

*This το προϊόν είναι για την ερευνητική χρήση μόνο, όχι για τη χρήση στις διαδικασίες διαγνώσεων. Είναι συστήνει ιδιαίτερα να διαβάσει αυτήν την οδηγία εξ ολοκλήρου πριν τη χρήση.

Προοριζόμενη χρήση

Αυτή η εξάρτηση σάντουιτς είναι για την ακριβή ποσοτική ανίχνευση ανθρώπινου Anandamide (επίσης γνωστού ως AEA) στον ορό, πλάσμα, supernates κυτταροκαλλιέργειας, κύτταρο lysates, ομοιογένειες ιστού.

Αντιδραστήριο παρεχόμενο

Το υλικό απαίτησε αλλά παρεχόμενος

• 37°C±0.5°C επωαστήρας
• Απορροφητικό έγγραφο
• Σιφώνια ακρίβειας και μίας χρήσης άκρες σιφωνίων
• Καθαροί σωλήνες
• Εξιοντισμένος ή αποσταγμένο νερό
• Αναγνώστης Microplate με 450 το φίλτρο μήκους κύματος ± 10nm

Προφυλάξεις

• Πριν από τη χρήση, η εξάρτηση και το δείγμα πρέπει να θερμαθούν φυσικά στη θερμοκρασία δωματίου 30 λεπτά.
• Αυτή η οδηγία πρέπει να ακολουθηθεί αυστηρά στο πείραμα.
• Μόλις αφαιρεθεί ο επιθυμητός αριθμός λουρίδων, ξανασφραγίστε αμέσως την τσάντα για να προστατεύσετε παραμένει από την επιδείνωση. Καλύψτε όλα τα αντιδραστήρια όταν όχι σε λειτουργία.
• Σιγουρευτείτε την εισαγωγή στο σιφώνιο της διαταγής και του ποσοστού προσθήκης από το καλά--φρεάτιο κατά τον εισαγωγή στο σιφώνιο των αντιδραστηρίων.
• Εισάγετε στο σιφώνιο τις άκρες και sealer πιάτων πρέπει υπό εξέταση να είναι καθαρό και μίας χρήσης για να αποφύγει την παράλληλη μόλυνση.
• Αποφύγετε τα αντιδραστήρια από τις διαφορετικές batch από κοινού.
• Η λύση Β υποστρωμάτων είναι ευαίσθητη στο φως, δεν εκθέτει τη λύση Β υποστρωμάτων στο φως για πολύ καιρό.
• Η λύση στάσεων περιέχει το οξύ. Παρακαλώ φορέστε την προστασία τη ματιών, χεριών και δερμάτων κατά χρησιμοποίηση αυτού του υλικού. Αποφύγετε την επαφή του δέρματος ή των βλεννωδών μεμβρανών με το αντιδραστήριο εξαρτήσεων.
• Η εξάρτηση δεν πρέπει να χρησιμοποιηθεί πέρα από την ημερομηνία λήξης.

Προετοιμασία αντιδραστηρίων

Όλα τα αντιδραστήρια πρέπει να παρουσιαστούν στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση.

Τα πρότυπα ανασυγκροτούν το 120μl των προτύπων (24ng/ml) με 120μl τυποποιημένο diluent για να παραγάγουν μια τυποποιημένη λύση αποθεμάτων 12ng/ml. Επιτρέψτε στα πρότυπα για να καθίσετε για 15 mins με την ευγενή αναταραχή πριν από την παραγωγή των διαλύσεων. Προετοιμάστε τα διπλά τυποποιημένα σημεία με σειριακά να αραιώσει την τυποποιημένη λύση αποθεμάτων (12ng/ml) 1:2 με τυποποιημένο diluent για τις λύσεις να παραγάγει 6ng/ml, 3ng/ml, 1.5ng/ml και 0.75ng/ml. Τυποποιημένο diluent χρησιμεύει ως τα μηά πρότυπα (0 ng/ml). Οποιαδήποτε υπόλοιπη λύση πρέπει να παγώσει σε -20°C και να χρησιμοποιηθεί μέσα σε έναν μήνα. Η διάλυση των τυποποιημένων λύσεων προτεινόμενων είναι η ακόλουθη:

Απομονωτής αραιό 20ml πλυσίματος της συμπύκνωσης 30x απομονωτών πλυσίματος εξιοντισμένος ή αποσταγμένο νερό για να παραγάγει 500 μιλ. του απομονωτή πλυσίματος 1x. Εάν τα κρύσταλλα έχουν διαμορφώσει στη συμπύκνωση, το μίγμα ήπια μέχρι τα κρύσταλλα έχει διαλύσει εντελώς.

Διαδικασία δοκιμής

1. Προετοιμάστε όλα τα αντιδραστήρια, τις τυποποιημένες λύσεις και τα δείγματα όπως καθοδηγείται. Φέρτε όλα τα αντιδραστήρια στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση. Η δοκιμή εκτελείται στη θερμοκρασία δωματίου.

2. Καθορίστε τον αριθμό λουρίδων που απαιτούνται για τη δοκιμή. Παρεμβάλτε τις λουρίδες στα πλαίσια για τη χρήση. Οι αχρησιμοποίητες λουρίδες πρέπει να αποθηκευτούν σε 2-8°C.

3. Προσθέστε τα πρότυπα 50μl στα πρότυπα καλά. Σημείωση: Μην προσθέστε το αντίσωμα στα πρότυπα καλά επειδή η τυποποιημένη λύση περιέχει το αντίσωμα.

4. Προσθέστε δείγμα στο δείγμα τα φρεάτια 40μl και προσθέτει έπειτα το αντίσωμα αντι-AEA 10μl στα φρεάτια δειγμάτων, κατόπιν προσθέστε 50μl streptavidin-HRP στα φρεάτια δειγμάτων και τα τυποποιημένα φρεάτια (μη κενός έλεγχος καλά). Μίγμα καλά. Καλύψτε το πιάτο με sealer. Επωάστε 60 λεπτά σε 37°C.

5. Αφαιρέστε sealer και πλύντε το πιάτο 5 φορές με τον απομονωτή πλυσίματος. Ενυδατώστε τα φρεάτια με τουλάχιστον τον απομονωτή πλυσίματος 0,35 μιλ. για 30 δευτερόλεπτα σε 1 λεπτό για κάθε πλύσιμο. Για την αυτοματοποιημένη πλύση, απορροφήστε όλα τα φρεάτια και πλύντε 5 φορές με τον απομονωτή πλυσίματος, που υπερχειλίζει τα φρεάτια με τον απομονωτή πλυσίματος. Λεκιάστε το πιάτο επάνω στις πετσέτες εγγράφου ή άλλο απορροφητικό υλικό.

6. Προσθέστε τη λύση Α υποστρωμάτων 50μl σε κάθε ένα καλά και προσθέστε έπειτα τη λύση Β υποστρωμάτων 50μl σε κάθε ένα καλά. Επωάστε το πιάτο που καλύπτεται με νέο sealer για 10 λεπτά σε 37°C στο σκοτάδι.

7. Προσθέστε τη λύση στάσεων 50μl σε κάθε μια καλά, το μπλε χρώμα θα αλλάξει σε κίτρινο αμέσως.

8. Καθορίστε την οπτική πυκνότητα (αξία OD) κάθε μια καλά αμέσως χρησιμοποιώντας έναν αναγνώστη microplate που τίθεται 450 NM μέσα σε 10 μενουέτα μετά από να προσθέσει τη λύση στάσεων.