TPI1 ανθρώπινη συνήθεια 96 εξαρτήσεων της ELISA ευαισθησία μεγέθους 9.15ng/L φρεατίων με το χρόνο δοκιμής 2 ωρών

TPI1 Isomerase Triosephosphate εξαρτήσεων δοκιμής της ELISA ανθρώπινη εξάρτηση δοκιμής της ELISA με το χρόνο δοκιμής 2 ωρών
 

Διαδικασία δοκιμής

1. Προετοιμάστε όλα τα αντιδραστήρια, τις τυποποιημένες λύσεις και τα δείγματα όπως καθοδηγείται. Φέρτε όλα τα αντιδραστήρια στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση. Η δοκιμή εκτελείται στη θερμοκρασία δωματίου.

2. Καθορίστε τον αριθμό λουρίδων που απαιτούνται για τη δοκιμή. Παρεμβάλτε τις λουρίδες στα πλαίσια για τη χρήση. Οι αχρησιμοποίητες λουρίδες πρέπει να αποθηκευτούν σε 2-8°C.

3. Προσθέστε τα πρότυπα 50μl στα πρότυπα καλά. Σημείωση: Μην προσθέστε το αντίσωμα στα πρότυπα καλά επειδή η τυποποιημένη λύση περιέχει το αντίσωμα.

4. Προσθέστε δείγμα στο δείγμα τα φρεάτια 40μl και προσθέτει έπειτα το αντίσωμα αντι-TPI1 10μl στα φρεάτια δειγμάτων, κατόπιν προσθέστε 50μl streptavidin-HRP στα φρεάτια δειγμάτων και τα τυποποιημένα φρεάτια (μη κενός έλεγχος καλά). Μίγμα καλά. Καλύψτε το πιάτο με sealer. Επωάστε 60 λεπτά σε 37°C.

5. Αφαιρέστε sealer και πλύντε το πιάτο 5 φορές με τον απομονωτή πλυσίματος. Ενυδατώστε τα φρεάτια με τουλάχιστον τον απομονωτή πλυσίματος 0,35 μιλ. για 30 δευτερόλεπτα σε 1 λεπτό για κάθε πλύσιμο. Για την αυτοματοποιημένη πλύση, απορροφήστε όλα τα φρεάτια και πλύντε 5 φορές με τον απομονωτή πλυσίματος, που υπερχειλίζει τα φρεάτια με τον απομονωτή πλυσίματος. Λεκιάστε το πιάτο επάνω στις πετσέτες εγγράφου ή άλλο απορροφητικό υλικό.

6. Προσθέστε τη λύση Α υποστρωμάτων 50μl σε κάθε ένα καλά και προσθέστε έπειτα τη λύση Β υποστρωμάτων 50μl σε κάθε ένα καλά. Επωάστε το πιάτο που καλύπτεται με νέο sealer για 10 λεπτά σε 37°C στο σκοτάδι.

7. Προσθέστε τη λύση στάσεων 50μl σε κάθε μια καλά, το μπλε χρώμα θα αλλάξει σε κίτρινο αμέσως.

8. Καθορίστε την οπτική πυκνότητα (αξία OD) κάθε μια καλά αμέσως χρησιμοποιώντας έναν αναγνώστη microplate που τίθεται 450 NM μέσα σε 10 μενουέτα μετά από να προσθέσει τη λύση στάσεων.

Cat.No E6795Hu

Τυποποιημένη σειρά καμπυλών: 20ng/L - 3500ng/L

Ευαισθησία: 9.15ng/L

Μέγεθος: 96 φρεάτια

*This το προϊόν είναι για την ερευνητική χρήση μόνο, όχι για τη χρήση στις διαδικασίες διαγνώσεων. Είναι συστήνει ιδιαίτερα να διαβάσει αυτήν την οδηγία εξ ολοκλήρου πριν τη χρήση.

Προοριζόμενη χρήση

Αυτή η εξάρτηση σάντουιτς είναι για την ακριβή ποσοτική ανίχνευση ανθρώπινο Isomerase Triosephosphate (επίσης γνωστό ως TPI1) στον ορό, πλάσμα, supernates κυτταροκαλλιέργειας, κύτταρο lysates, ομοιογένειες ιστού.

Αρχή δοκιμής

Αυτή η εξάρτηση δοκιμής elisa είναι μια ένζυμο-συνδεμένη Immunosorbent δοκιμή (ELISA). Το πιάτο έχει καλυφθεί προηγουμένως με το ανθρώπινο αντίσωμα TPI1. TPI1 παρουσιάστε στο δείγμα προστίθεται και δεσμεύει στα αντισώματα που ντύνονται στα φρεάτια. Και έπειτα το ανθρώπινο αντίσωμα TPI1 προστίθεται και δεσμεύει σε TPI1 στο δείγμα. Κατόπιν streptavidin-HRP προστίθεται και δεσμεύει στο αντίσωμα Biotinylated TPI1. Μετά από την επώαση αποδεσμευμένο streptavidin-HRP πλένεται μακριά κατά τη διάρκεια ενός βήματος πλύσης. Η λύση υποστρωμάτων προστίθεται έπειτα και το χρώμα αναπτύσσεται αναλογικά προς το ποσό του ανθρώπινου TPI1. Η αντίδραση ολοκληρώνεται από την προσθήκη της όξινης λύσης στάσεων και η απορροφητικότητα μετριέται σε 450 NM.

Αντιδραστήριο παρεχόμενο

Προφυλάξεις

• Πριν από τη χρήση, η εξάρτηση και το δείγμα δοκιμής elisa πρέπει να θερμαθούν φυσικά στη θερμοκρασία δωματίου 30 λεπτά.
• Αυτή η οδηγία πρέπει να ακολουθηθεί αυστηρά στο πείραμα.
• Μόλις αφαιρεθεί ο επιθυμητός αριθμός λουρίδων, ξανασφραγίστε αμέσως την τσάντα για να προστατεύσετε παραμένει από την επιδείνωση. Καλύψτε όλα τα αντιδραστήρια όταν όχι σε λειτουργία.
• Σιγουρευτείτε την εισαγωγή στο σιφώνιο της διαταγής και του ποσοστού προσθήκης από το καλά--φρεάτιο κατά τον εισαγωγή στο σιφώνιο των αντιδραστηρίων.
• Εισάγετε στο σιφώνιο τις άκρες και sealer πιάτων πρέπει υπό εξέταση να είναι καθαρό και μίας χρήσης για να αποφύγει την παράλληλη μόλυνση.
• Αποφύγετε τα αντιδραστήρια από τις διαφορετικές batch από κοινού.
• Η λύση Β υποστρωμάτων είναι ευαίσθητη στο φως, δεν εκθέτει τη λύση Β υποστρωμάτων στο φως για πολύ καιρό.
• Η λύση στάσεων περιέχει το οξύ. Παρακαλώ φορέστε την προστασία τη ματιών, χεριών και δερμάτων κατά χρησιμοποίηση αυτού του υλικού. Αποφύγετε την επαφή του δέρματος ή των βλεννωδών μεμβρανών με το αντιδραστήριο εξαρτήσεων.
• Η εξάρτηση δοκιμής elisa δεν πρέπει να χρησιμοποιηθεί πέρα από την ημερομηνία λήξης.

Περίληψη

1. Προετοιμάστε όλα τα αντιδραστήρια, τα δείγματα και τα πρότυπα.

2. Προσθέστε το δείγμα και το αντιδραστήριο της ELISA σε κάθε ένα καλά. Επωάστε για 1 ώρα σε 37°C.

3. Πλύντε το πιάτο 5 φορές.

4. Προσθέστε τη λύση Α και Β. Incubate υποστρωμάτων για 10 λεπτά σε 37°C.

5. Προσθέστε τη λύση στάσεων και το χρώμα αναπτύσσεται.

6. Διαβάστε την αξία OD μέσα σε 10 λεπτά.

Υπολογισμός του αποτελέσματος

Κατασκευάστε μια τυποποιημένη καμπύλη με τη χάραξη του μέσου OD για κάθε πρότυπα στον κάθετο (ω) άξονα ενάντια στη συγκέντρωση στον οριζόντιο (X) άξονα και επισύρετε την προσοχή μια καλής εφαρμογής καμπύλη μέσω των σημείων στη γραφική παράσταση. Αυτοί οι υπολογισμοί μπορούν να εκτελεσθούν καλύτερα με το βασισμένο σε υπολογιστή καμπύλη-κατάλληλο λογισμικό και η καλής εφαρμογής γραμμή μπορεί να καθοριστεί από την ανάλυση οπισθοδρόμησης.